ANYEEP TQ9100液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)在脂溶性維生素檢測中的應(yīng)用
引言
脂溶性維生素(包括維生素A、D、E、K)是人體必需的營養(yǎng)素,參與視覺、骨骼健康、抗氧化及凝血等關(guān)鍵生理功能。
由于維生素缺乏可能導(dǎo)致不可逆的臨床癥狀(如夜盲癥、佝僂病、生育功能異常等),精準(zhǔn)檢測血清中脂溶性維生素水平對(duì)指導(dǎo)營養(yǎng)補(bǔ)充及疾病預(yù)防具有重要意義。ANYEEP TQ9100液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)(LC-MS/MS)憑借其高靈敏度、高選擇性和多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)能力,成為脂溶性維生素檢測的理想工具。本文詳細(xì)介紹了該系統(tǒng)在人血清中維生素A、25-羥基維生素D2/D3、維生素E及維生素K1檢測中的應(yīng)用,并驗(yàn)證了其方法學(xué)性能。

安益譜TQ9100三重四極桿液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀
1. 方法優(yōu)勢(shì)
1.1 雙離子源兼容性
TQ9100系統(tǒng)支持電噴霧離子化源(ESI)和大氣壓化學(xué)電離源(APCI)雙模式。
- ESI模式:適用于極性較強(qiáng)的維生素(如維生素D代謝物),通過質(zhì)子化實(shí)現(xiàn)高效離子化
- APCI模式:適用于熱穩(wěn)定性較好的維生素(如維生素E、K1),通過氣相電離減少基質(zhì)干擾
1.2 多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)技術(shù)
MRM模式通過篩選母離子-子離子對(duì)(如維生素A的269.1→93.1、維生素D3的401.2→365.4),實(shí)現(xiàn)目標(biāo)化合物的高選擇性定量,顯著降低背景噪聲,提升信噪比(S/N)
1.3 高效液相分離
采用Phenomenex Kinetex F5色譜柱(3.0mm×50mm,2.6μm),結(jié)合梯度洗脫程序(表1),在4分鐘內(nèi)完成5種維生素的分離,縮短了分析時(shí)間。
2. 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 樣品處理
- 取樣
- 內(nèi)標(biāo)添加
- 沉淀蛋白
- 氮吹復(fù)溶
2.2 色譜條件
- 流動(dòng)相
- 梯度程序
2.3 質(zhì)譜條件
- 離子化溫度
- 噴霧電壓
- MRM參數(shù)
- 維生素A
- 25OHVD3
3. 方法學(xué)驗(yàn)證
3.1 線性范圍與回歸方程
5種維生素在ESI和APCI模式下均呈現(xiàn)良好線性(r2>0.99),線性范圍覆蓋臨床檢測需求:
- 維生素A:20-2000 ng/mL(ESI),40-2000 ng/mL(APCI)
- 25OHVD2/D3:1-50 ng/mL(ESI/APCI)
3.2 精密度與準(zhǔn)確度
- 精密度:低濃度(線性范圍下限3倍)和高濃度(線性范圍上限70%)的RSD%均<10%(VK1在ESI低濃度時(shí)為17.9%)
- 準(zhǔn)確度:回收率在90.5%-105.6%之間,符合臨床檢測要求
4. 臨床應(yīng)用價(jià)值
4.1 特定人群營養(yǎng)監(jiān)測
- 孕婦與兒童:維生素D缺乏可能導(dǎo)致胎兒骨骼發(fā)育異常,定期檢測可指導(dǎo)補(bǔ)充劑量
- 老年人:維生素K缺乏與骨質(zhì)疏松相關(guān),檢測結(jié)果可輔助預(yù)防骨折風(fēng)險(xiǎn)
4.2 疾病相關(guān)檢測
- 脂肪吸收障礙患者:維生素E缺乏可能加重氧化應(yīng)激損傷,檢測結(jié)果可評(píng)估病情嚴(yán)重程度
5. 結(jié)論
ANYEEP TQ9100液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)通過雙離子源兼容性、MRM高選擇性檢測及高效液相分離技術(shù),實(shí)現(xiàn)了人血清中5種脂溶性維生素的快速、精準(zhǔn)檢測。該方法具有線性范圍寬、精密度高、準(zhǔn)確度好的特點(diǎn),適用于臨床營養(yǎng)監(jiān)測及疾病輔助診斷,為個(gè)性化維生素補(bǔ)充提供了科學(xué)依據(jù)。未來可進(jìn)一步優(yōu)化自動(dòng)化樣品處理流程,提升檢測通量。


